Die Serie entführt hinter die Kulissen der fiktiven Live-Sketch-Comedy-Show "Studio 60 on the Sunset Strip" - oder kurz "Studio 60" - auf dem ebenso fiktiven TV-Sender NBS. Allerdings geht die Sendung, die an das Format von Saturday Night Live angelehnt ist, rasant den Bach runter. Jeder der Beteiligten scheint irgendein Problem zu haben, allen voran der ausführende Produzent, der vor laufender Kamera einen fatalen Tobsuchtsanfall bekommt und daraufhin gefeuert wird. Um das sinkende NBS-Flaggschiff zu retten, holen der Vorstandsvorsitzende Jack Rudolph (Steven Weber) und Unterhaltungschefin Jordan McDeere (Amanda Peet) zwei frische Gesichter an Bord: Die Langzeitfreunde Danny Tripp (Bradley Whitford) und Matt Albie (Matthew Perry) sollen es richten. Während sie beide als Produzenten fungieren, übernimmt Danny auch noch die Regie und Matt wird neuer Chefautor.